Testul
de paternitate - descrierea stiintifica a analizei genetice
Bagaj
informational stiintific
Fiecare
fiinta umana are 46 de cromozomi. 23 din partea mamei si 23 din partea
tatalui. Fiecare pereche de cromozomi are acelasi fond informational
genetic cu mici variatii. Doi cromozomi din cei 46 sunt fie cromozomi
X- sau Y-. Combinatia XX da nastere sexului feminin, iar XY sexului
masculin.
Variatiile din interiorul cromozomilor
ADN
–ului realizeaza o structura unica pentru fiecare fiinta
umana.
Numai gemenii identici (dintr-un singur ou) au acelasi ADN. Totusi,
jumatate din cromozomii unei persoane sunt aproape identici cu
jumatatea ADN-ului paternal sau maternal.
Acest
aspect permite
compararea ADN –ului apartinand tatalui, mamei si copilului
(sau
numai al tatalui si al copilului) pentru demonstrarea sau excluderea
paternitatii. Analiza efectuata de noi compara regiuni caracteristice
ale ADN-ului. Regiunile contin modele care se repeta. Numarul
repetitiilor difera de la persoana la persoana.
Sunt
copiate si
amplificate regiunile pe care dorim sa le testam pentru a se inlesni
analizarea unei mostre cat mai mari. Apoi testam lungimea si numarul
repetitiilor din fragmentele alese. In final, lungimea fragmentelor,
pentru toate persoanele testate, este comparata si calculata cu
ajutorul computerului. Aceasta ne permite sa calculam probabilitatea
paternitatii.
Amplificarea
ADN-ului
Mai
intai trebuie sa copiem si sa amplificam regiunile pe care dorim sa le
testam. Simultan, marcam fragmentele ADN-ului cu substante
fluorescente. Se permite astfel detectarea asa-numitelor secvente
capilare.
Pentru a copia fragmentele utilizam
reactia in lant
de polimerizare. Aceasta reactie in lant este creata de o enzima care
copiaza ADN-ul prin mai multe etape.
Dupa 30 de
etape, teoretic
am creat pana la 1 miliard de copii identice. Acest proces este similar
cu acela al diviziunii celulare, unde fiecare celula contine aceeasi
informatie ADN.
Analiza
fragmentelor ADN
Pe
masura ce copiem si amplificam fragmentele ADN, in acelasi timp le
marcam cu substante fluorescente. O data ce mostrele sunt expuse
luminii laser, aceste culori vor aparea pe frecvente diferite.
Fragmentele
marcate cu substanta colorata sunt apoi separate prin electroforeza.
Fragmentele sunt expuse unui camp electronic si impinse printr-un tub
foarte subtire (o capilara). Acest tub este umplut cu un polimer
vascos. Avandu-se in vedere ca ADN-ul este incarcat negativ, el va fi
mutat la polul pozitiv in cadrul unui camp electric. Fragmentele mai
lungi vor avea nevoie de mai mult timp pentru a ajunge la polul
respectiv, fata de cele mai scurte.
La capatul
capilarei un laser
trimite lumina monocolora. Aceasta lumina laser stimuleaza portiunile
colorate cu substanta fluorescenta sa emita o lumina cu o anumita
lungime a razei. Culoarea fragmentelor ne permite sa le identificam pe
fiecare. Faptul ca putem sa masuram timpul necesar unui fragment pentru
a ajunge la polul pozitiv ne ajuta sa deducem apoi lungimea
fragmentului.
Evaluare
Statistica
Apoi,
informatiile referitoare la toate lungimile masurate sunt compilate in
computer. Computerul calculeaza congruentele intre toate fragmentele
apartinand persoanelor testate. Aceste calcule sunt exprimate apoi in
probabilitatea si sansele paternitatii investigate.
Pentru
a
obtine acest lucru, programul utilizeaza distributia statistica a
datelor, apartinand tuturor variantelor posibile ale markerului aferent
unui anumit grup de populatie, denumita tabele de frecventa. Frecventa
pentru fiecare varianta este diferita (spre ex. exista variante care se
regasesc numai la anumite persoane, si variante care se regasesc la
multi indivizi). In consecinta, posibilitatea unei congruente
accidentale intre doua persoane va fi diferita in fiecare caz.
Desigur,
markerii utilizati in testele noastre au o importanta crescuta.
Combinatia a cel putin 16 markeri ne permite sa garantam o
probabilitate de cel putin 99,99%. Aceasta inseamna ca in cazul unei
corelatii totale intre copil si presupusul tata, posibilitatea unei
congruente accidentale ar fi mai mica de 0.01%.
Pentru mai
multe informatii, nu ezitati sa ne contactati pe www.delphitest.org.publicat pe
www.medicinasportiva.ro la 21 aprilie 2008